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摘要: 目的探讨利用分子生物学方法直接快速检测临床标本中淋球菌gyrA基因突变的可行性。方法设计针对淋球菌gyrA基因的特异扩增引物,运用聚合酶链反应-单链构象多态性技术(PCR-SSCP)对95份泌尿生殖道标本直接进行基因及突变检测,并与测序及药敏试验结果进行对比分析。结果32份分离培养阴性的标本无特异性扩增产物,而63份分离培养阳性标本以及对应的分离菌株均能扩增出168 bp片断。以淋球菌标准株ATCC19424为对照,分离菌株对环丙沙星敏感的5份临床标本与标准株SSCP带型相同;分离菌株对环丙沙星中介或耐药的58份临床标本与标准株SSCP带型均不同,共出现5种突变带型。5份SSCP分析显示,无突变的标本gyrA基因序列未发生改变;16份SSCP分析显示,有突变的标本gyrA基因序列均有改变;具有相同突变的标本SSCP带型完全相同,具有不同突变类型的标本SSCP带型不同。结论PCR-SSCP银染技术可简便、快速、准确地检测临床标本中淋球菌对氟喹诺酮类药物的敏感性。
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