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日本血吸虫过氧化物氧化还原蛋白SjPrxⅠ的原核表达及其免疫调节功能

张奕 陈鹤 刘芳 谢园园 王书书 沈继龙 徐元宏

张奕, 陈鹤, 刘芳, 谢园园, 王书书, 沈继龙, 徐元宏. 日本血吸虫过氧化物氧化还原蛋白SjPrxⅠ的原核表达及其免疫调节功能[J]. 中华疾病控制杂志, 2015, 19(8): 835-838. doi: 10.16462/j.cnki.zhjbkz.2015.08.020
引用本文: 张奕, 陈鹤, 刘芳, 谢园园, 王书书, 沈继龙, 徐元宏. 日本血吸虫过氧化物氧化还原蛋白SjPrxⅠ的原核表达及其免疫调节功能[J]. 中华疾病控制杂志, 2015, 19(8): 835-838. doi: 10.16462/j.cnki.zhjbkz.2015.08.020

日本血吸虫过氧化物氧化还原蛋白SjPrxⅠ的原核表达及其免疫调节功能

doi: 10.16462/j.cnki.zhjbkz.2015.08.020
基金项目: 国家自然科学基金(81171606);
详细信息
  • 中图分类号: R383.24

  • 摘要: 目的对日本血吸虫氧化还原蛋白(peroxiredoxin of schistosoma japonicum,SjPrx)的表达、纯化,接种小鼠和体外刺激脾细胞,研究SjPrx I在体内外诱导免疫应答的作用及可能机制。方法 Gen Bank获取SjPrx编码序列,设计合成引物进行PCR扩增;构建质粒,通过转化将构建的重组质粒转入感受态细胞,然后小量扩增菌株,电泳检测克隆成功表达。蛋白质印迹法(western blot,WB)验证融合蛋白后大量表达纯化。将重组SjPrxⅠ通过腹腔注射BALB/c小鼠,本科联免疫吸附实验和流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测脾细胞分泌细胞因子。结果成功构建了SjPrx I-p ET28a质粒,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达后得到可溶性SjPrx I,纯化后的SjPrxⅠ免疫小鼠,其淋巴细胞高水平表达Th2细胞分泌的IL-4(t=6.69,P<0.001)、IL-10(z=3.18,P=0.001)和IL-13(t=4.21,P=0.001)。结论制备了重...
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